Kako liofilizacija čuva biološki materijal

Liofilizacija, poznata i kao liofilizacija, postupak je koji se koristi za očuvanje biološkog materijala uklanjanjem voda iz uzorka, koja uključuje prvo zamrzavanje uzorka, a zatim sušenjem pod vakuumom pri vrlo maloj količini temperature. Liofilizirani uzorci mogu se čuvati mnogo duže od neobrađenih uzoraka.

Zašto se koristi liofilizacija?

Liofilizacija, ili liofilizacijom sušenja bakterijskih kultura, stabilizira kulture za dugotrajno skladištenje uz minimaliziranje štete koja može nastati strogim sušenjem uzorka. Mnogi mikroorganizmi opstaju dobro kada se liofiliziraju i nakon duljeg vremena skladištenja mogu se lako rehidratirati i uzgajati u kulturama.

Liofilizacija se također koristi u biotehnologija i biomedicinske industrije za očuvanje cjepiva, uzoraka krvi, pročišćeni proteinii drugi biološki materijal.

Ovaj kratki laboratorijski postupak može se upotrijebiti s bilo kojim komercijalno dostupnim sušilicama za zamrzavanje kako biste sačuvali svoju kolekciju kulture.

Postupak

Proces liofilizacije zapravo je primjena fizičkog fenomena koji se naziva sublimacija: prijelaz neke tvari iz krutog u plinovito stanje, bez prethodnog prolaska kroz tekućinu faza. Tijekom liofilizacije, voda iz smrznutog uzorka uklanja se kao vodena para, bez prethodnog odmrzavanja uzorka.

instagram viewer

Uobičajene pogreške

Jedna od najčešćih pogrešaka kada je u pitanju liofilizacija je nepoznavanje tališta vašeg uzorka, što otežava odabir ispravnog liofilizatora. Uzorci se mogu rastopiti tijekom postupka. Još jedna česta pogreška je mišljenje da je hladnije hladnije sušenjem na sušilici za zamrzavanje na polici. Tijekom primarnog sušenja trebali biste postaviti temperaturu na policu točno ispod eutektičke temperature uzorka. Treba biti dovoljno topline da se molekule uzorka potaknu da se kreću - ali sprječavaju topljenje.

Treća greška je pogrešna oprema za vaše uzorke. Budući da se sušilice za zamrzavanje koriste u skupnim postavkama, trebali biste znati sljedeće prije kupnje:

  • Kolika će vlaga biti liofilizirana
  • Koliki je uzorak (i ​​eutektička temperatura)
  • Kako pravilno koristiti sušilicu za zamrzavanje

Ako se jedinica ne koristi pravilno, to može pokvariti sve uzorke. Što nas dovodi do još jedne uobičajene pogreške: Ne održavanjem vakuumske pumpe. Crpka mora biti u ispravnom stanju kako bi liofilizacija djelovala. Ako pumpa bude otvorena 30 minuta prije i nakon postupka sušenja smrzavanjem, pumpa će povećati život pumpe. Otvaranjem balastnog plina čisti se onečišćenja iz pumpe kako bi se spriječilo oštećenje unutarnjih komponenti. Trebali biste često provjeravati ulje na pumpama radi promjene boje i čestica, te prema potrebi mijenjati ulje. Redovite izmjene ulja drže crpku u optimalnom vakuumu tijekom postupka sušenja smrzavanjem.

I na kraju, pogrešna oprema za sušenje zamrzavanjem za vaš postupak liofilizacije također može biti velika pogreška. Treba li vam uzorak čepa pod vakumom? Tada je potrebna zaustavna komora. Da li sušite u tikvicama? Zatim budite sigurni da imate komoru za sušenje s otvorima.

Izbjegavanjem gornjih grešaka možete osigurati bolju njegu sušilice i pumpe za zamrzavanje i imati bolje uzorke kada je sušenje zamrzavanjem izvršeno.

Reference
Labconco vijesti. "Top 5 pogrešaka u procesu liofilizacije."