Da bi se različite vrste odvojile od uobičajenih predaka i vozile evolucija, mora doći do reproduktivne izolacije. Postoji nekoliko vrsta reproduktivne izolacije koja vodi specijalizaciji. Jedna od najčešćih metoda je prezigotska izolacija koja se odvija prije nego što dođe do oplodnje između gamete i sprječava nastajanje različitih vrsta seksualno se reproducira. U osnovi, ako se pojedinci ne mogu reproducirati, smatra se da su različiti vrsta i razilaze se na drvetu života.
Postoji nekoliko vrsta prezigotske izolacije u rasponu od nespojivosti gameta do ponašanja što rezultira nekompatibilnošću, pa čak i vrstom izolacije koja fizički inhibira pojedince od rasplod.
Mehanička izolacija - nekompatibilnost spolnih organa - vjerojatno je najjednostavniji način da se zaustavi reprodukcija pojedinaca jedni s drugima. Bilo da se radi o obliku reproduktivnih organa, lokaciji ili razlikama u veličini zabraniti pojedincima da se spajaju, kada se spolni organi ne uklapaju, parenje nije vjerojatno dogoditi se.
U biljkama mehanička izolacija djeluje malo drugačije. Budući da veličina i oblik nisu bitni za reprodukciju biljaka, mehanička izolacija obično proizlazi iz korištenja različitog oprašivača za biljke. Na primjer, biljka strukturirana za oprašivanje pčela neće biti kompatibilni s cvijećem na koje se oslanjaju kolibrići da šire svoj pelud. Iako je to još uvijek rezultat različitih oblika, nije bitan oblik stvarnih gameta, već neusklađenost oblika cvijeta i oprašivača.
Različite vrste imaju tendenciju da imaju različite sezone uzgoja. Vrijeme ciklusa plodnosti kod žena može rezultirati vremenskom izolacijom. Slične vrste mogu biti fizički kompatibilne, ali se ipak ne mogu razmnožavati zbog sezone parenja koja se događaju u različito doba godine. Ako su ženke jedne vrste plodne tijekom određenog mjeseca, ali mužjaci se ne mogu razmnožavati u to doba godine, to može dovesti do reproduktivne izolacije između dviju vrsta.
Ponekad se sezone parenja vrlo sličnih vrsta donekle preklapaju. To je posebno istinito ako vrste žive na različitim područjima, ne ostavljajući nikakve šanse za hibridizaciju. Međutim, pokazano je da slične vrste koje žive u istom području obično nemaju faze preklapanja parenja, čak i ako se nalaze u različitim okruženjima. Najvjerojatnije, ovo je priroda prilagodbe namijenjena smanjenju konkurencije za resurse i drugove.
Druga vrsta prezigotske izolacije između vrsta ima veze s ponašanjem pojedinaca, a osobito ponašanjem oko vremena parenja. Čak i ako su dvije populacije različitih vrsta mehanički i vremenski kompatibilne, njihov je stvarno ritualno ponašanje parenja moglo bi biti dovoljno da vrste ostane u reproduktivnoj izolaciji od jedne još.
Rituali parenja, zajedno s drugim potrebnim načinima parenja - poput parenja i parenja za parenje - vrlo su potrebni za mužjake i žene iste vrste kako bi se pokazalo da je vrijeme za reprodukciju. Ako se ritual parenja odbaci ili ne prepozna, tada se neće dogoditi parenje i vrste će se reproduktivno izolirati jedna od druge.
Na primjer, the plavokosi plijen ptica ima vrlo složen ples parenja koji mužjaci moraju izvoditi da bi utkali ženku. Ženka će ili prihvatiti ili odbiti napredovanje mužjaka, međutim, druge vrste ptica koje nemaju istu ženski ples u potpunosti će zanemariti ples, što znači da se nemaju priliku reproducirati sa ženskom plavokođom mina.
Čak i vrlo srodne vrste imaju sklonosti u pogledu gdje žive i gdje se razmnožavaju. Ponekad su ta preferirana mjesta reproduktivnih događaja nespojiva među vrstama, što dovodi do izolacije staništa. Očito, ako jedinke dvije različite vrste žive nigdje blizu, neće biti mogućnosti reprodukcije. Ova vrsta reproduktivne izolacije dovodi do još daljnjeg određivanja.
Međutim, čak i različite vrste koje žive na istom lokalitetu možda nisu kompatibilne zbog preferiranog mjesta razmnožavanja. Postoje neke ptice koje više vole da određena vrsta stabla, ili čak različiti dijelovi istog stabla, polažu jaja i prave svoja gnijezda. Ako se slične vrste ptica nalaze na tom području, oni će odabrati drugačija mjesta i neće ih križati. Zbog toga se vrste razdvajaju i ne mogu se razmnožavati jedna s drugom.
Gametska izolacija osigurava da samo spermatozoidi iste vrste mogu prodrijeti u jaje te vrste, a nitko drugi. Tijekom spolne reprodukcije žensko jaje se stapa s muškom spermom i zajedno stvaraju zigotu. Ako sperma i jaje nisu kompatibilni, oplodnja se ne može dogoditi. Zbog nekih kemijskih signala koje jaje oslobađa, spermatozoidi ga možda čak i ne privlače. Drugi čimbenik koji sprečava fuziju je sperma koja ne može prodrijeti u jajašce zbog vlastitog kemijskog sastava. Bilo koji od ovih razloga dovoljan je da zaustavi fuziju i spriječi stvaranje zigote.
Ova vrsta reproduktivne izolacije posebno je važna za vrste koje se eksterno razmnožavaju u vodi. Na primjer, ženke većine vrsta riba jednostavno ispuštaju svoja jaja u vodu svog omiljenog mjesta uzgoja. Muške ribe te vrste tada dolaze i puštaju spermu preko jajašca kako bi ih oplodile. Međutim, budući da se to događa u tekućem okruženju, neke sperme otpadaju molekule vode i raspršuju se. Ako ne postoje mehanizmi za getsku izolaciju, bilo koja sperma mogla bi se stopiti s bilo kojim jajašcem, što bi rezultiralo da se hibridi bilo koje vrste tada pare u vodi.